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GE percoll细胞分离液17-0891-01几大要素
点击次数:782 发布时间:2018-05-08

GE percoll细胞分离液17-0891-01几大特点:

特点一:Percoll为低粘度的密度梯度介质,用于分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子。粘度低,因此使用低的离心力(200-1000× g),只需几分钟就可形成梯度对细胞进行分离。Percoll供货时已经消毒,并且易于再次消毒。包装于易打开,并可再次密封的250ml和1升瓶中。

特点二:1、在温和的条件下,分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子(可小至~70S),保持其存活和形态的完整性

2、对细胞无毒性

3、可调整到生理状态下的离子强度和pH

4、使用角转头,以中速离心,即可形成梯度

5、等渗梯度,密度zui大可达到1.3 g/ml。

特点三:操作简单:1.不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
 Percoll浓度(%)  70    60    50    40    30     20
  比重g/ml    1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
2.不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层Percoll比重相差不大时,可将Percoll液放入注射器中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。
3.装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。
4.离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层Percoll之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
5.取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。

 

 

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